調節性T細胞(Treg)是T細胞的一個特殊亞型,它能抑制T細胞的反應,在預防自身免疫、維持免疫系統的穩定和對自身抗原耐受等方面具有重要的作用,因而它們在治療自身免疫疾病、預防移植排斥和腫瘤免疫治療方面具有巨大的潛力,所以利用 Treg的抑制作用達到疾病治療的目的,是目前科研人員極其感興趣的領域之一。
實驗過程中,常常需要對細胞進行計數,但是,人們往往會被該選用什么樣的計數方法而困擾。樣本(新鮮全血或者凍存臍血)的不同、實驗目的不同(細胞分選或者接種)、計數原理的不同,都決定著合適的細胞計數方法的選擇。
在現代生命科學研究中,大部分的工作是通過基因功能研究來探索生命現象,如何實現轉基因是科學實驗過程中不可缺少的實驗技術,而細胞轉染是完成這一過程的必需步驟。
科幻電影中將凍存若干年的生命體重新解凍復活的情節在生命科學研究過程中每一天都在上演。為了將每一種有生命的細胞較好的保存其原有的細胞特性或者長久的保存種質資源,實驗人員往往將細胞用特殊配置的細胞凍存液保存于-196℃的液氮,使得細胞暫時脫離生長狀態,等到實驗需要的時候再從液氮中取出復蘇應用。
大鼠各類血細胞含量比例
小鼠全血中各類細胞含量比例
小鼠免疫細胞含量比例
如何用普通離心管分離PBMC?
人的CD抗原
人全血中各種細胞類型的含量,小鼠免疫細胞類型的比例
NK細胞高表達CD56,因此可以利用這一特性進行NK細胞的分選。目前,進行NK細胞分選的主要方法有流式分選和磁珠分選。磁珠分選根據其是否使用分離柱分為有柱分選和無柱分選。
SepTube?離心管是專門為分離PBMC設計的一款離心管,使用該離心管可在短至15分鐘內分離得到PBMC。SepTube?離心管內置獨特的插件,可防止密度梯度離心液和血液樣本發生混合,您可以使用移液器快速加入或傾倒血液至密度梯度離心液上層。離心后,PBMC可被輕松地傾倒于一個新的試管中,而無需緩慢吸取。適合于從大量血液樣本中分離PBMC。
從臍帶血(CB)中分選CD34+造血干細胞,有多種分選策略,本文介紹了幾種常用的分選方法,以便快速獲得高純度、高活性的目的細胞。
SeptubeTM是一種專門用于快速、簡單地進行細胞分選的密度梯度離心管。該離心管內置一個隔板,可防止淋巴細胞分離液(如LymphoprepTM)和血液樣品發生混合。將淋巴細胞分離液通過隔板中央的小孔加入離心管中,而樣本可被迅速加入或傾倒于隔板上方,減少了加樣時的費力、費時操作。離心只需10分鐘,且無需開啟離心機剎車,進一步節省了用于分選的時間。
RosetteSepTM是一種通過密度梯度離心直接從人全血中分離高純度細胞的快速細胞分選方法。
自然殺傷(NK)細胞是一種表達多型性受體的稀有淋巴細胞,在先天免疫系統起著至關重要的作用。通常通過流式細胞分選或免疫磁珠分選的方法將NK細胞分選出來,為此北京諾為生物代理的加拿大STEMCELL Technologies提供了獨特的NK細胞分選技術。
大鼠和人類的代謝、生理有很多相似之處,可以作為研究代謝紊亂、藥物的藥效學、毒理學和心血管疾病的理想動物模型。大鼠也是免疫研究領域中非常理想的動物模型之一,在免疫學研究中經常被使用,但長期以來一直由于缺乏研究大鼠細胞的相關試劑,掣肘了大鼠動物模型在基礎科研中的應用。
EasySep主要利用四聚體復合物(TAC)技術,其一端與細胞表面抗原結合,另一端結合納米微珠,使目的細胞被EasySep微珠標記,然后通過EasySep磁極的作用,將目的細胞與非目的細胞分開,從而將目的細胞分選出來。利用EasySep分選試劑盒可以從新鮮或者凍存的外周血單個核細胞(PBMC)、白膜層等樣本中分離出目的細胞。
實驗過程中,常常需要去除血液中的紅細胞,以減少紅細胞對實驗的影響。由于實驗目的不同,紅細胞去除率要求不同,實驗方法就會不同。通常采用的方法是裂解和沉淀。