造血干細胞研究工具
血液細胞分類和細胞生物標記
Stem cell markers
小鼠造血干細胞的表面標記以及三種不同流式分選分析方法:LSK, SLAM, ESLAM。
小鼠造血干細胞長周期培養系統(LTC)可以用于檢測和計數原始造血祖細胞。在該培養系統中,如果提供適當的培養基、培養添加物以及適當的培養條件,原始造血細胞與粘附的基質細胞共培養則可以持續數周產生髓系克隆祖細胞和成熟粒細胞以及巨噬細胞。LTC培養系統也一直被用于淋巴細胞的產生和定量研究。
造血細胞CFU集落檢測是目前體外檢測造血干/祖細胞功能的金標準。CFU檢測通常是將造血細胞以一定的密度接種于添加了適當細胞因子的半固體培養基(如:甲基纖維素半固體培養基(MethoCult?))中。相比于瓊脂,在低溫條件下,甲基纖維素的粘稠度更容易控制,加入的細胞因子活性更穩定,更適合于集落的形成和生長。
使用StemSpan?白血病細胞培養試劑盒進行體外藥物篩選
人HSPCs中最被熟知的標志物是細胞表面糖蛋白CD34。該標志物可用于從骨髓和血液中鑒定和分離HSPCs,因為它在大多數(非全部)人HSPCs上高表達,但不表達于成熟血細胞。CD34+細胞不表達成熟血細胞具有的所謂的譜系(Lin)標志物,例如CD2、CD3、CD11b、CD11c、CD14、CD16、CD19、CD24、CD56、CD66b和CD235。而一些標志物在CD34+細胞群上的表達具有異質性,例如CD38、CD45RA、CD90和CD49f。
人CFU檢測的計數
CFU檢測的建立
手動細胞計數
細胞樣本的制備
MethoCult?培養基的制備
CFU培養基的選擇
CFU集落鑒定
MethoCult? 人集落形成單位(CFU)檢測 常見問題分析
小鼠造血集落檢測