單克隆抗體的簡述以及單克隆抗體制備的流程和篩選策略
?單克隆抗體:由一個B細胞克隆或其雜交瘤或通過分子生物學手段克隆構建單個抗體基因轉染的細胞系產生的,只能識別一種抗原表位的高度均一的蛋白抗體。
不管是制備單抗還是多抗,抗原的設計與制備都是一個非常重要的問題,設計或者制備得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗體來??乖暮脡臎Q定是否能夠成功制備特異性的抗體。
制備好抗原后,就要進行動物免疫了,免疫這一步除了動物自身的因素外,還要有良好的免疫計劃才能得到更好的免疫效果。
諾為生物提供的甲基纖維素培養基(ClonaCell-HY培養基D)將雜交瘤細胞的挑選和克隆步驟結合在一起,從而將生成單克隆抗體所需的時間減少到19天。
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細胞融合后,一旦鑒定可以產生目標抗體,就應立即進行克隆化,確保能分離出單個細胞重新形成克隆。
融合細胞后,對克隆細胞上清檢測,篩選分泌抗體的雜交瘤細胞。
細胞融合指兩個或者多個細胞的原生質體融合形成一個雜種細胞的過程。廣義上的細胞融合可以是同種屬的細胞發生,也可以是不同種屬的細胞發生。
介紹制備單抗的培養基體系以及配制。
在體外培養細胞實驗中,對于難養的細胞或者數量較少的細胞,常常需要預先在培養瓶或培養板底部加入一些活的原代細胞或者靜息的腫瘤細胞以輔助目的細胞的生長,這就是飼養層細胞。在單抗制備過程中,剛剛融合的細胞和克隆化的細胞都比較難以生長,因此都需要添加飼養層才能較快地生長。
新病原體的出現和傳播是對人類健康的持續威脅。疫苗接種可以提供積極和持續的保護,但新疫苗的開發是一個緩慢的過程。雖然早期有科學家提出從超免疫血清注射多克隆免疫球蛋白來進行病毒預防和治療,但這種方法仍然存在諸多問題。而單克隆抗體是超免疫血清的理想替代品。