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            金準生物

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            流式細胞檢測分析技術服務

            流式細胞術(Flow Cytometry,FCM)是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒(如微球,細菌,小型模式生物等)逐個進行快速定性、定量分析和分選的技術。該技術廣泛的運用于從基礎研究到臨床實踐的各個方面,涵蓋了細胞生物學、免疫學、血液學、腫瘤學、藥理學、遺傳學及臨床檢驗等領域??蓹z測培養細胞、組織樣本、分離細胞等,其檢測結果以直方圖、二維圖或假三維圖表示,用于檢測免疫表型分析(白血病、淋巴瘤、干細胞、疾病診斷、藥物評價)、DNA含量及細胞周期分析、細胞特異性標記物、細胞凋亡研究、基因轉染鑒定等方面。

            流式分選可對檢測到的任意感興趣細胞群進行分選,然后進行后續實驗研究(如細胞培養、Western blot、PCR、測序、染色體分析等)。

            1. 提前2-3天預約。實驗周期1-3天

            2. 儀器參數供實驗設計:

            a. 3激光(405nm, 488nm, 637nm)

            激光器

            帶通濾光片

            推薦染料

            488nm

            530/30

            FITC, Alexa Fluor 488, BB515

            574/26

            PE,PI,eYFP,mCitrine ,Venus

            695/40

            Percp-eFluor710, Percp-Cy5.5, Percp, 7-AAD

            780/60

            PE-Cy?7,QdotTM 800

            637nm

            660/20

            APC, eFluor 660, Alexa Fluor 647

            720/30

            Alexa Fluor 700, APC-R700

            780/60

            APC-eFluor780, APC-H7, APC-Cy7

            405nm

            440/50

            Alexa Fluor 405,Pacific Blue,DAPI,BV421, eFluor 450

            512/25

            Pacific Green,AmCyan,BV510 ,Horizon V500

            603/48

            Pacific Orange, QdotT 605,BV570,BV605,eFluor 605NC

            710/50

            Qdot 705,BV650,BV711

            b. 2激光 (488nm, 640nm)

            激光器

            帶通濾光片

            推薦染料

            488nm

            530/30

            FITC, Alexa Fluor 488, BB515

            574/26

            PE,PI,eYFP,mCitrine ,Venus

            695/40

            Percp-eFluor710, Percp-Cy5.5, Percp, 7-AAD

            780/60

            PE-Cy?7,QdotTM 800

            637nm

            660/20

            APC, eFluor 660, Alexa Fluor 647

            720/30

            Alexa Fluor 700, APC-R700

            780/60

            APC-eFluor780, APC-H7, APC-Cy7

            3. 服務項目包括:

            a) 干細胞檢測(造血干細胞、間充質干細胞、多能干細胞等);

            b) DNA倍體分析、DNA含量分析、細胞周期等;

            c) 細胞凋亡:Annexin V/PI 或Annexin V/7-AAD檢測;

            d) 細胞表面抗原分析:淋巴細胞免疫分型、白血病及淋巴瘤免疫分型、血小板相關抗體分析(CD62P\CD41a)、HLA-B27、PNH相關抗原檢測(CD55/CD59)等;

            e) 胞內細胞因子檢測,如FoxP3、IFN等;

            f) 免疫細胞及亞群分析(T/B/NK及其亞群分析);

            g) Treg細胞檢測;Th1/Th2/Th17/Th22細胞檢測;

            h) 線粒體功能、細胞氧化狀態測定(ROS);

            i) 其它指標:細胞內鈣離子測定、耐藥基因檢測(p170、MRP、LRP)及凋亡基因(P53、CD95、c-erb B2、Bcl-2及Bax)等。

            4. 委托方需要提供除樣本、細胞數量以及抗體(可代為采購)外其它相關資料如下:

            a) 詳細的流式細胞實驗設計,如實驗目的、樣品來源、處理方法等(經技術人員溝通確定);

            b) 檢測要求,如分選還是分析;

            c) 其它與流式細胞技術相關的信息。

            5. 服務流程

            實驗設計→樣本收集及細胞處理→細胞標記→流式細胞儀分析→圖像與數據處理

            6. 樣本及保存條件

            a) 未標記細胞:細胞數1~2×10^6以上,4℃或者-80℃凍存后干冰運輸;

            b) 抗體標記后細胞:每管細胞數2×10^5以上,200~500μL,4℃保存運輸(2小時內檢測),或者多聚甲醛固定后運輸(24小時內檢測)。

            7. 收費標準:

            A. 已標記樣品,直接檢測待測樣品方案:

            檢測項目收費標準

            數量

            價格

            1)       開機50元。   具體價格請咨詢客服人員(010-57438396)。


            50

            2)       流式細胞檢測:(以上收費標準不包含抗體等試劑費用)

            胞膜標記: 35元/管



            胞內核內標記(如CD4, IL-17, CD8,   IFN,IL-2): 100元/管



            Treg:65元/管



            細胞凋亡:25元/管



            細胞周期:25元/管



            3)       一次送檢標本數不少于10個。如果一次送檢標本總數不足10個,每個測試費用為標準收費×2。低于5000元須一次性全額預付實驗費,高于5000元,客戶預付實驗全款的70%。

            注:由用戶提供的樣品或試劑所致的實驗問題由用戶負責。


            ×2

            合計:



            B.僅提供樣品,檢測待測樣品方案:

            服務項目

            樣品準備

            應用的試劑

            收費

            價格

            細胞周期細胞

            細胞—胰酶消化—PBS洗滌—70%乙醇4℃固定過夜(不超過一周)

            RNA酶,PI染料

            <10個樣品,120元/個

            >10個樣品,100元/個

            試劑費已包括。


            細胞凋亡

            新鮮培養的細胞

            Annexin V細胞凋亡檢測試劑盒

            <10個樣品,150元/樣品

            >10個樣品,120元/樣品

            含試劑費用,客戶提供試劑可減20元,另需細胞培養費用


            免疫細胞分型

            培養的細胞:如白血病細胞,客戶刺激好的細胞、抗凝全血、脾勻漿

            破膜劑,固定劑,刺激劑、特異性抗體(需客戶提供)

            雙染:
              <10個樣品,120元/樣品
              >10個樣品,100元/樣品

            三染:在原來基礎上加50元

            需要分離細胞、培養、刺激的具體情況另記


            表面抗原鑒定

            培養的細胞

            特異性抗體(需客戶提供)

            單染:
              <10個樣品,120元/樣品
              >10個樣品,100元/樣品

            雙染:在原來基礎上加50元

            三染:在原來基礎上加50元


            細胞內

            鈣離子檢測

            培養的細胞

            Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針)

            <10個樣品,150元/樣

            >10個樣品,120元/樣品(已包含試劑)


            線粒體功能

            僅適用于懸浮或貼壁培養的新鮮細胞

            客戶提供試劑盒

            檢測費可同細胞周期


            細胞分選



            收費:標記費用+分選儀使用費用(600元/小時


            合計:




            8.檢測報告:

            a)含流式實驗結果和方法實驗報告單

            b)提供全套檢測圖表、原始數據


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