流式細胞檢測分析技術服務

流式細胞術（Flow Cytometry，FCM）是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒（如微球，細菌，小型模式生物等）逐個進行快速定性、定量分析和分選的技術。該技術廣泛的運用于從基礎研究到臨床實踐的各個方面，涵蓋了細胞生物學、免疫學、血液學、腫瘤學、藥理學、遺傳學及臨床檢驗等領域?？蓹z測培養細胞、組織樣本、分離細胞等，其檢測結果以直方圖、二維圖或假三維圖表示，用于檢測免疫表型分析（白血病、淋巴瘤、干細胞、疾病診斷、藥物評價）、DNA含量及細胞周期分析、細胞特異性標記物、細胞凋亡研究、基因轉染鑒定等方面。

流式分選可對檢測到的任意感興趣細胞群進行分選，然后進行后續實驗研究（如細胞培養、Western blot、PCR、測序、染色體分析等）。

1. 提前2-3天預約。實驗周期1-3天

2. 儀器參數供實驗設計：

a. 3激光（405nm, 488nm, 637nm）

激光器	帶通濾光片	推薦染料
488nm	530/30	FITC, Alexa Fluor 488, BB515
	574/26	PE，PI，eYFP，mCitrine ，Venus
	695/40	Percp-eFluor710, Percp-Cy5.5, Percp, 7-AAD
	780/60	PE-Cy?7，QdotTM 800
637nm	660/20	APC, eFluor 660, Alexa Fluor 647
	720/30	Alexa Fluor 700, APC-R700
	780/60	APC-eFluor780, APC-H7, APC-Cy7
405nm	440/50	Alexa Fluor 405，Pacific Blue，DAPI，BV421， eFluor 450
	512/25	Pacific Green，AmCyan，BV510 ，Horizon V500
	603/48	Pacific Orange， QdotT 605，BV570，BV605，eFluor 605NC
	710/50	Qdot 705，BV650，BV711

b. 2激光（488nm, 640nm）

激光器	帶通濾光片	推薦染料
488nm	530/30	FITC, Alexa Fluor 488, BB515
	574/26	PE，PI，eYFP，mCitrine ，Venus
	695/40	Percp-eFluor710, Percp-Cy5.5, Percp, 7-AAD
	780/60	PE-Cy?7，QdotTM 800
637nm	660/20	APC, eFluor 660, Alexa Fluor 647
	720/30	Alexa Fluor 700, APC-R700
	780/60	APC-eFluor780, APC-H7, APC-Cy7

3. 服務項目包括：

a) 干細胞檢測(造血干細胞、間充質干細胞、多能干細胞等)；

b) DNA倍體分析、DNA含量分析、細胞周期等；

c) 細胞凋亡：Annexin V/PI 或Annexin V/7-AAD檢測；

d) 細胞表面抗原分析：淋巴細胞免疫分型、白血病及淋巴瘤免疫分型、血小板相關抗體分析（CD62P\CD41a）、HLA-B27、PNH相關抗原檢測（CD55/CD59）等；

e) 胞內細胞因子檢測，如FoxP3、IFN等；

f) 免疫細胞及亞群分析（T/B/NK及其亞群分析）；

g) Treg細胞檢測；Th1/Th2/Th17/Th22細胞檢測；

h) 線粒體功能、細胞氧化狀態測定（ROS）；

i) 其它指標：細胞內鈣離子測定、耐藥基因檢測（p170、MRP、LRP）及凋亡基因（P53、CD95、c-erb B2、Bcl-2及Bax）等。

4. 委托方需要提供除樣本、細胞數量以及抗體（可代為采購）外其它相關資料如下：

a) 詳細的流式細胞實驗設計，如實驗目的、樣品來源、處理方法等（經技術人員溝通確定）；

b) 檢測要求，如分選還是分析；

c) 其它與流式細胞技術相關的信息。

5. 服務流程

實驗設計→樣本收集及細胞處理→細胞標記→流式細胞儀分析→圖像與數據處理

6. 樣本及保存條件

a) 未標記細胞：細胞數1~2×10^6以上，4℃或者-80℃凍存后干冰運輸；

b) 抗體標記后細胞：每管細胞數2×10^5以上，200~500μL，4℃保存運輸（2小時內檢測），或者多聚甲醛固定后運輸（24小時內檢測）。

7. 收費標準：

A. 已標記樣品，直接檢測待測樣品方案：

檢測項目收費標準	數量	價格
1) 開機50元。具體價格請咨詢客服人員(010-57438396)。		50
2) 流式細胞檢測：（以上收費標準不包含抗體等試劑費用）胞膜標記： 35元/管
胞內核內標記（如CD4, IL-17, CD8, IFN,IL-2)： 100元/管
Treg：65元/管
細胞凋亡：25元/管
細胞周期：25元/管
3) 一次送檢標本數不少于10個。如果一次送檢標本總數不足10個，每個測試費用為標準收費×2。低于5000元須一次性全額預付實驗費，高于5000元，客戶預付實驗全款的70%。注：由用戶提供的樣品或試劑所致的實驗問題由用戶負責。		×2
合計：

B.僅提供樣品，檢測待測樣品方案：

服務項目	樣品準備	應用的試劑	收費	價格
細胞周期細胞	細胞—胰酶消化—PBS洗滌—70%乙醇4℃固定過夜（不超過一周）	RNA酶，PI染料	<10個樣品，120元/個 >10個樣品，100元/個試劑費已包括。
細胞凋亡	新鮮培養的細胞	Annexin V細胞凋亡檢測試劑盒	<10個樣品，150元/樣品 >10個樣品，120元/樣品含試劑費用，客戶提供試劑可減20元，另需細胞培養費用
免疫細胞分型	培養的細胞：如白血病細胞，客戶刺激好的細胞、抗凝全血、脾勻漿	破膜劑，固定劑，刺激劑、特異性抗體（需客戶提供）	雙染： <10個樣品，120元/樣品 >10個樣品，100元/樣品三染：在原來基礎上加50元需要分離細胞、培養、刺激的具體情況另記
表面抗原鑒定	培養的細胞	特異性抗體（需客戶提供）	單染： <10個樣品，120元/樣品 >10個樣品，100元/樣品雙染：在原來基礎上加50元三染：在原來基礎上加50元
細胞內鈣離子檢測	培養的細胞	Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針)	<10個樣品，150元/樣 >10個樣品，120元/樣品（已包含試劑）
線粒體功能	僅適用于懸浮或貼壁培養的新鮮細胞	客戶提供試劑盒	檢測費可同細胞周期
細胞分選			收費：標記費用+分選儀使用費用（600元/小時）
合計：

8.檢測報告：

a)含流式實驗結果和方法實驗報告單

b)提供全套檢測圖表、原始數據

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