人胚胎干細胞 hES實驗方法與知識匯總
人胚胎干細胞(hESCs)具有在體外自我更新擴增和分化為多種類型細胞的潛能,可為再生醫學的替代療法提供充足的細胞來源。
Matrigel作為一種基質膠,經常被用于各種細胞的培養以及類器官的形成,但Matrigel種類繁多,如何正確選擇一款Matrigel是解決細胞餓殍用的關鍵一步。為了更有效地幫助大家了解Matrigel產品、改善產品選擇流程,同時解決可能出現的問題,本文特地整理了一系列常見問題解答(FAQ)。
類器官屬于三維(3D)細胞培養物,包含其代表器官的一些關鍵特性。此類體外培養系統包括一個自我更新干細胞群,可分化為多個器官器官特異性的細胞類型,與對應的器官擁有類似的空間組織并能夠重現對應器官的部分功能,從而提供一個高度生理相關系統.
胃類器官
最近在分離上皮祖細胞和基質細胞以及確定對肺發育重要的生態因子上取得的進展,已經導致建立了一個體外的3D肺組織培養細胞。
?肝臟是一個重要的器官,參與廣泛的過程,如解毒,蛋白質合成,代謝和激素的產生。盡管在體內具有驚人的再生能力,但是在體外,肝細胞的擴增仍然是一個挑戰。肝上皮細胞作為器官的生長為研究人員提供了穩定的肝細胞群,可用于肝臟生物學、疾病建模和毒性篩選等多個領域的研究。
腦類器官是源于人多能干細胞(hPSC)的三維體外培養系統,這些系統再現了發育中人類大腦的發育過程和組織。它們為人神經系統所特有的神經發育和疾病過程的研究提供了一個具生理相關性的體外模型。它們為人神經系統所特有的神經發育和疾病過程的研究提供了一個具生理相關性的體外模型。在研究人類大腦發育和神經系統疾病如自閉癥、精神分裂癥或由寨卡病毒感染而引起的腦缺陷,神經類器官發揮重要的作用。
類器官這項技術自問世起,就快速且廣泛的應用于多種方面,包括基礎研究、轉化醫學和工業。類器官相關的文獻也占據了各大高影響因子的期刊封面,更在2017年被Nature評為Method of the Year 2017。
當細胞擴增到一定數量以后,建議將其凍存起來進行后續的研究。目前用的最多的凍存液為10%FBS+DMSO+培養基凍存,但是血清的存在可能會影響后期細胞的應用。本文采用無血清凍存液,分別采用團塊形式和單細胞形式進行hPSC的凍存。
在多能干細胞培養基中生長的hPSC,當集落變得較大、中心變得密集和明亮(對比其邊緣),而相鄰的集落開始融合時,這時可進行細胞傳代。
用于鑒定干細胞的方法有多種:傳統AP 染色鑒定形態、核酸方法鑒定(qPCR 檢測基因表達、染色體核型分析、轉座因子分析、DNA 甲基化分析),還有基于抗體的蛋白鑒定方法(如免疫熒光、免疫印跡、流式細胞術等應用)。
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無滋養層無血清的培養條件下,多能干細胞的需要有特殊的基質膠促進貼壁和生長?;|膠鋪的好壞對hPSC培養有很大的影響。
STEMdiff?腦類器官試劑盒為無血清培養系統,設計用于從人胚胎干細胞(ES)和誘導多能干細胞(iPS)生成腦類器官,基于MA Lancaster和JA Knoblich8發表的配方研發。培養40天后,這些腦類器官具有層次分明的祖細胞群,并產生成熟神經元,與在早期發育中人腦皮質層的觀察結果相符。
還在為取材困難而無法建立疾病模型煩惱嗎?利用Episomal重編程系統可將10 mL外周血誘導生成無外源基因插入的hiPSCs,為您輕松建立理想的疾病模型.